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SN/T 2206.11-2014 化妝品微生物檢驗方法 第11部分:金黃色葡萄球菌 多重實時熒光PCR法

1 范圍

SN/T 2206的本部分規定了化妝品中金黃色葡萄球菌的多重實時熒光PCR檢測方法。

本部分適用于化妝品中金黃色葡萄球菌的定性檢測。

2 規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

      GB/T 6682-2008 分析實驗室用水規格和試驗方法

      GB 7918.1 化妝品微生物標準檢驗方法 總則

      GB 7918.5 化妝品微生物標準檢驗方法 金黃色葡萄球菌

      SN/T 1193 基因實驗室技術要求

3 術語、定義和縮略語

下列術語、定義和縮略語適用于本文件。
3.1 術語和定義

Ct值 Cycle threshold Ct

      每個反應管內的熒光信號到達設定的闌值時所經歷的循環數。

3.2 縮略語

      Taq:水生棲熱菌(Thermus aquaticu)

      FAM:6-羧基熒光素(6-carboxyfluorescein)

HEX:6-羥基-2’,4,4’,5', 7’,7’-六氯熒光素(5-hexachioro--fluorescein)

BHQ:黑洞淬滅基(Black hole quencher)

4 檢測方法

4.1 方法原理

加人多對引物和與模板DNA匹配的、兩端有熒光基團標記的寡核昔酸探針進行PCR反應。PCR 每進行一次循環,合成的新鏈數與釋放的熒光基團數呈對應關系,即PCR產物的量與熒光信號的強度呈對應關系。當熒光信號超過所設定的闌值時,熒光信號可被檢測出來,儀器檢測熒光信號的增加量可以間接地體現樣品模板DNA的目的基因的擴增量。


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